大腸桿菌發酵經驗總結及注意事項

首先，補料速率與比生長速率直接影響著乙酸的生成速率和積累量（主要是補料速率與比生長速率影響發酵液中的殘糖量，進而影響），所以適當的控制補料速率和比生長速率，對于控制乙酸的量有很好的效果。

其次，必須要保證充足的溶氧，并嚴格控制pH值，而且補酸堿的速率盡量緩和，不能太快；溫度對于蛋白的表達也有很重要的影響，較低的發酵溫度下所生產出的蛋白大多是有活性的，而較高的發酵溫度下產生的蛋白大多一包涵體形式存在。

第三，選取合理的誘導時間非常重要，一般的誘導時間選在指數生長后期，而且誘導時的比生長速率最好能控制在0.2之內，選在此時誘導，1.將菌體的快速生長期與蛋白合成期分開，使這兩個階段互不影響，有利于蛋白的高表達；2.已經得到了大量的菌體，而且菌體的生物量基本接近穩定，不論是從動力學角度，還是能耗，物料成本方面，都比較合理。

第四，補料過程中的碳氮比也很重要。若氮源過高，會使菌體生長過于旺盛，pH偏高，不利于代謝產物的積累，氮源不足，則菌體繁殖量少從而影響產量；碳源過多，則容易刑場較低的pH，抑制菌體生長，碳源不足，則容易引起菌體的衰老和自溶。另外，碳氮比不當還會引起菌體按比例的吸收營養物質，從而直接影響菌體的生長和產物的合成。
根據自己的經驗，一般情況下，對于一個穩定的發酵工藝下，如果總是在固定的發酵時間段出現溶菌現象，而且能排除噬菌體和染菌的可能性后，那就可能是因為碳氮比不合理造成的。可以適當調整碳氮比。